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試劑盒售后解析ELISA測定結果

日期:2025-08-01 16:39
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摘要: 今早,我公司吳收到由沈陽農業大學朱老師發來的會話。朱老師在2020年連續購買了6次ELISA試劑盒,上周,朱老師我司技術說想要試試自己配的試劑盒,看看檢測效果。在朱老師給吳的會話中表示:“我的這個檢測結果不理想,不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因可以嗎?”我公司試劑盒售后客服吳說可以,并為朱老師安排技術解析Elisa測定結果。 朱老師的主要問題是:我自己合成8個氨基酸的抗原短肽,和BSA耦連后免疫動物,1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后...
今早,我公司吳收到由沈陽農業大學朱老師發來的會話。朱老師在2020年連續購買了6次ELISA試劑盒,上周,朱老師我司技術說想要試試自己配的試劑盒,看看檢測效果。在朱老師給吳的會話中表示:“我的這個檢測結果不理想,不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因可以嗎?”我公司試劑盒售后客服吳說可以,并為朱老師安排技術解析Elisa測定結果。
   

朱老師的主要問題是:我自己合成8個氨基酸的抗原短肽,和BSA耦連后免疫動物,1個月后用ELISA測定血清中針對抗原短肽的抗體滴度,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小時,再用1%OVA37度封閉2小時,洗板3次。待測血清用10%小牛血清倍比稀釋,37度溫育1小時,洗板3次,加入二抗,37度溫育40分鐘,洗板3次,加TMB顯色,結果比較詭異,陰性對照也顯色了,且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢?是洗板的問題嗎? 

   

十分鐘后,技術員給朱老師去解答。可以根據這幾個方面分析: 

1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;你一抗、二抗每次洗板時洗5遍以上。
2.封閉液的問題,你說陰性對照也顯色了,那zui主要的問題應該是封閉,應重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關的帖,你搜一下看看。
3.建議ELISA試劑盒包被在37度兩小時,這樣的效果可能會好一些。

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